رفع اشکال کامل و تخصصی الکتروفورز DNA | ژل اگارز| بیوتکنولوژی

امتیاز کاربران

ستاره فعالستاره فعالستاره فعالستاره فعالستاره فعال
 

مطالب مرتبط: 

 

مشکلات الکتروفورز DNA و دلایل احتمالی آنها

 مشکلات الکتروفورز ,DNA و دلایل احتمالی آنها, شدت پایین همه , یا تعدادی از باندهای DNA, اسمیر شدن باندها , مشکل:‌ الگوهای باند غیر معمول , مشکل:‌ باندهای منحنی شکل DNA, ,مشکل:‌ باقی ماندن DNA در ژل ,مشکل:‌ تعیین مقدار غلظ , شکل گیری نا مناسب چاهک های ژل , بارگیری بیش از اندازه DNA , آلوده شدن نمونه DNA, اثر GEL SHIFT , ژل آگارز چیست , الکتروفورز ژل آگارز, الکتروفورز ,ژل پلی آکریل آمید, الکتروفورز ژل,  sds-page , طرز تهیه ژل پلی آکریل آمید , مراحل انجام الکتروفورز , الکتروفورز dna ,مراحل انجام الکتروفورز dna ,

 

مشکل: شدت پایین همه یا تعدادی از باندهای DNA

دلایل احتمالی:‌

  • بارگذاری مقدار کم DNA Ladder
  • رنگ آمیزی ناکافی و یا ناهمگون
  • خارج شدن DNA از ژل
  • نفوذ و پخش شدن DNA در ژل
  • پوشیده شدن DNA توسط رنگ های مورد استفاده در رنگ آمیزی

 

مشکل: اسمیر شدن باندها

دلایل احتمالی:

  • تجزیه شدن DNA توسط نوکلئازها
  • شرایط نا مناسب الکتروفورز
  • اثر GEL SHIFT
  • بارگزاری بیش از اندازه DNA
  • غلظت بالای نمک در نمونه
  • شکل­گیری نامناسب چاهک های ژل

 

مشکل:‌ الگوهای باند غیر معمول

دلایل احتمالی:  

  • قبل از باگیری DNA مارکر گرم نشد.
  • دناتوره شدن DNA
  • شرایط بارگیری متفاوت برای نمونه DNA و مارکر DNA
  • شرایط نا مناسب الکتروفورز
  • استفاده از درصد ناصحیح ژل و یا بافر
  • مهاجرت غیر معمول به دلیل توالی ها و یا ساختارهای مختلف DNA
  • اثر GEL SHIFT
  • غلظت بالای نمک در نمونه ها

 

مشکل:‌ باندهای منحنی شکل DNA

دلایل احتمالی:‌

  • ژل به طور کامل در بافر الکتروفورز قرار نگرفته است.
  • حجم نمونه ها کم می باشد.
  • شرایط عمل الکتروفورز نامناسب است.
  • حباب ها و یا ذرات بزرگی در چاهک های ژل و یا خود ژل موجود می باشند.

 

مشکل:‌ باقی ماندن DNA در ژل

دلایل احتمالی:

  • شکل گیری نا مناسب چاهک های ژل
  • بارگیری بیش از اندازه DNA
  • آلوده شدن نمونه DNA
  • اثر GEL SHIFT

 

مشکل:‌ تعیین مقدار غلظ

دلایل احتمالی:‌

  • شرایط بارگیری متفاوت بین مارکر DNA و نمونه ها
  • تعیین باند غلظ مارکر برای تعیین مقدار نمونه
  • استفاده از روش تعیین مقدار نامناسب
  • رنگ امیزی ناهمگون ژل و نیز رنگ شدن پس زمینه نیز می تواند بر نتایج تعیین مقدار ژل اثر بگذارد.
  • پوشیده شدن DNA توسط رنگ های مسیریابی

 

فیلم آموزش الکتروفورز DNA تولید شده در فرایند PC | ژل آگارز (زبان انگلیسی)

 

 

♦♦♦ در صورت داشتن هرگونه سوال در مورد این موضوع برای ما نظر بگذارید (در پایین همین صفحه). در اسرع وقت به تمامی سوالات شما توسط کارشناس مربوطه پاسخ داده خواهد شد. با تشکر ♦♦♦

مطالب مشابه :

دیدگاه‌ها  

# پرش باندAtefe 1397-06-25 23:14
سلام،میخواستم بدونم علت پرش باند بعد از انجام الکتروفورز چی هست؟یعنی بعد از گرفتن عکس و یا دیدن زیر uv،میبینیم که بعضی از باندها نیستن و دچار پرش شدن؟علتش چی میتونه باشه به نظرتون؟
پاسخ دادن
# پاسخ پرش باندپوریا غلامی تیلکو 1397-06-25 23:51
سلام. اگر منظورتون الکتروفورز DNA هست یکی از دلایل اصلی اثر خود اشعه uv هست که باعث شکست قطعات شده و باند محو میشود. همچنین دقت کنید باندها تحت فشار الکتریکی کشیده شده ند و در حالت فشرده قرار دارن و پس از قطع جریان شروع به باز شده میکنن که منجبر به کم رنگ شدن باند میگردد. به هر حال دلیل اول موجه تر است
پاسخ دادن
# ژل آگارز و دستگاه ژل داکالهه سعیدی 1397-06-26 08:44
سلام ، من به تازگی کار مولکولی شروع کردم جدیدا در دیدن ژل در ژل داک به مشکل بر خوردم رنگ ژل نسبت به سابق عوض شده و از بنفش به صورتی و حتی روشن تر در زمان تابش uv ایجاد شده طوری که دیتکت کردن بسیار سخت میشه حتی نمیشه از ژل عکس گرفت دلیل این امر میتونه رنگ آمیزی بد باشه یا صدمه دیدن صفحه ی uv در اثر پاک کردن با وایتکس 10%؟؟؟؟
پاسخ دادن
# پاسخ ژل آگارز و دستگاه ژل داکپوریا غلامی تیلکو 1397-06-26 15:31
سلام. جفتش میتونه باشه و باید تست بشه. شاید لامپ یو وی خرابه و یا درصد ژل صحیح نیست. دقت کنید دای معمولا خراب نمیشه.
پاسخ دادن
# پاسخ: رفع اشکال کامل و تخصصی الکتروفورز DNA | ژل اگارز| بیوتکنولوژیسپیده 1397-07-01 17:40
سلام/باندهای من هلالی میشوند و میخوام دلیلشو بدونم$
ممنون
پاسخ دادن
# پاسخ: رفع اشکال کامل و تخصصی الکتروفورز DNA | ژل اگارز| بیوتکنولوژیپوریا غلامی تیلکو 1397-07-02 18:12
مهمترین دلیل هلالی شدن ولتاژ بالای جریان است. همچنین میتواند به دلیل وجود حباب در انتهای ژل باشد که موجب نابرابری جریان در سراسر ژل میشود. از دلادیل دیگر کیفیت ژل، کیفت منبع ولتاز هست که باید بررسی شود.
پاسخ دادن
# عدم رويت باند مورد نظرمهديه 1397-07-10 22:21
من در سري اول كه براي قطعه ٢kb پي سي آر گذاشتم باند مورد نظر خودم را گرفتم اما در سري بعد براي تكرار متاسفانه باندي نديدم،سوالم اينه چرا باند نمي بينم،تشكر
پاسخ دادن
# پاسخپوریا غلامی تیلکو 1397-07-10 22:28
دلایل بسیاری زیادی برای عدم تشکیل باند هست و باید تمام عوامل بررسی شود. به طور کلی اصل کار کلونینگ پیدا کردن دلایل عدم موفقیت هست. انجام کامل یک کلونیگ با تمام مراحل در تئوری دوهفته زمان میخواهد اما در عمل بیش از یک سال طول میکشد. پس جزئیات بیشتری از کار رو در نظر بگیرید. همچنین به مبحث pcr در سایت هم مراجعه فرمایید. http://bio1.ir/laboratory-techniques/pcr/169-pcr.html
پاسخ دادن
# پاسخ: رفع اشکال کامل و تخصصی الکتروفورز DNA | ژل اگارز| بیوتکنولوژیصبا 1397-07-29 21:40
سلام. من در الکتروفورز باند غیراختصاصی دیدم. چه تغییراتی در pcr باید انجام بدم تا باند غیراختصاصی تشکیل نشه؟؟
پاسخ دادن
# پاسخ: رفع اشکال کامل و تخصصی الکتروفورز DNA | ژل اگارز| بیوتکنولوژیali 1397-08-01 15:25
سلام. گاهی محصول پی سی
ار باید در محدوده هزارو پانصد (مثلا برای یک باکتری خاص) باید باند بدهد اما از روی لدر که نگاه میکنید اندازه باند بین 100 تا 200 جفت باز است؟ مشکل کجای کار بوده؟. ممنون
پاسخ دادن

نوشتن دیدگاه

تصویر امنیتی
تصویر امنیتی جدید

کانال تلگرامی بیوتکنولوژی و زیست شناسی اینستاگرام بیوتکنولوژی, bio1 ریسرچ گیت گوگل اسکولار بیوتکنولوژی لینکدین بیوتکنولوژی
تمام حقوق این سایت متعلق به گروه bio1 به سرپرستی پوریا غلامی تیلکو می باشد . نقل مطالب متمم بدون ذکر منبع، تخلف محسوب شده و متخلفین بر اساس قوانین جاری کشور مورد پیگرد قانونی قرار می گیرند.

جستجو