مطالب مرتبط:
- توضیح کامل تکنیک SDS-PAGE + رفع اشکال تکنیک الکتروفورز عمودی
- راهنمای کامل الکتروفورز آگارز + تصویری | بیوتکنولوژی
- رفع اشکال کامل و تخصصی الکتروفورز DNA | ژل اگارز| بیوتکنولوژی
- تئوری و مبانی کامل ژل الکتروفورز +تصویری | بیوتکنولوژی
- اصول تکنیک الکتروفورز DGGE (ژل الکتروفورز با گرادیان شیب ماده دناتوره کننده)
- تکنیک الکتروفورز دو بعدی | بیوتکنولوژی
- الکتروفورز پروتئین سرم(SPEP) | روش اجرا | و شرح کامل اجزای سرم پروتئین
- ایزوالکتروفوکوسینگ | IEF | بیوتکنولوژی | الکتروفورز با نقطه ایزوالکتریک
مشکلات الکتروفورز DNA و دلایل احتمالی آنها
مشکل: شدت پایین همه یا تعدادی از باندهای DNA
دلایل احتمالی:
- بارگذاری مقدار کم DNA Ladder
- رنگ آمیزی ناکافی و یا ناهمگون
- خارج شدن DNA از ژل
- نفوذ و پخش شدن DNA در ژل
- پوشیده شدن DNA توسط رنگ های مورد استفاده در رنگ آمیزی
مشکل: اسمیر شدن باندها
دلایل احتمالی:
- تجزیه شدن DNA توسط نوکلئازها
- شرایط نا مناسب الکتروفورز
- اثر GEL SHIFT
- بارگزاری بیش از اندازه DNA
- غلظت بالای نمک در نمونه
- شکلگیری نامناسب چاهک های ژل
مشکل: الگوهای باند غیر معمول
دلایل احتمالی:
- قبل از باگیری DNA مارکر گرم نشد.
- دناتوره شدن DNA
- شرایط بارگیری متفاوت برای نمونه DNA و مارکر DNA
- شرایط نا مناسب الکتروفورز
- استفاده از درصد ناصحیح ژل و یا بافر
- مهاجرت غیر معمول به دلیل توالی ها و یا ساختارهای مختلف DNA
- اثر GEL SHIFT
- غلظت بالای نمک در نمونه ها
مشکل: باندهای منحنی شکل DNA
دلایل احتمالی:
- ژل به طور کامل در بافر الکتروفورز قرار نگرفته است.
- حجم نمونه ها کم می باشد.
- شرایط عمل الکتروفورز نامناسب است.
- حباب ها و یا ذرات بزرگی در چاهک های ژل و یا خود ژل موجود می باشند.
مشکل: باقی ماندن DNA در ژل
دلایل احتمالی:
- شکل گیری نا مناسب چاهک های ژل
- بارگیری بیش از اندازه DNA
- آلوده شدن نمونه DNA
- اثر GEL SHIFT
مشکل: تعیین مقدار غلظ
دلایل احتمالی:
- شرایط بارگیری متفاوت بین مارکر DNA و نمونه ها
- تعیین باند غلظ مارکر برای تعیین مقدار نمونه
- استفاده از روش تعیین مقدار نامناسب
- رنگ امیزی ناهمگون ژل و نیز رنگ شدن پس زمینه نیز می تواند بر نتایج تعیین مقدار ژل اثر بگذارد.
- پوشیده شدن DNA توسط رنگ های مسیریابی
فیلم آموزش الکتروفورز DNA تولید شده در فرایند PC | ژل آگارز (زبان انگلیسی)
♦♦♦ در صورت داشتن هرگونه سوال در مورد این موضوع برای ما نظر بگذارید (در پایین همین صفحه). در اسرع وقت به تمامی سوالات شما توسط کارشناس مربوطه پاسخ داده خواهد شد. با تشکر ♦♦♦
مطالب مشابه :
- اصول PCR و کاربردهای آن، طراحی پرایمر
- دستگاه فرمانتور | بیوراکتور چیست؟
- کامل ترین مجموعه کروماتوگرافی |انواع و روشهای کروماتوگرافی| بیوتکنولوژی
- بهینهسازی تولید | طراحی آزمایشها با روش متدولوژی سطح پاسخ (RSM)
- معرفی تجهيزات آزمايشگاهی
- رفع اشکال تخصصی روش بلاتینگ نیمه خشک (سمی درای) | بیوتکنولوژی
- آموزش قدم به قدم طراحی ازمایش (RSM) | با نرم افزار دیزاین اکسپرت +نحوه ارائه در مقالات علمی و پایان نامه ها
- رفع اشکال تکنیک وسترن بلات(Western blot)|بصورت کامل و تخصصی | بیوتکنولوژی
- طراحی آزمایش چیست؟ | آموزش کلیات به همراه توضیحات کامل هر مرحله
- آموزش RSM| تحلیل نمودارهای آماری در روش سطح پاسخ | نرم افزار دیزاین اکسپرت
دیدگاهها
ممنون
ار باید در محدوده هزارو پانصد (مثلا برای یک باکتری خاص) باید باند بدهد اما از روی لدر که نگاه میکنید اندازه باند بین 100 تا 200 جفت باز است؟ مشکل کجای کار بوده؟. ممنون
شاید سوالم پیش پا افتاده باشه. اما میخواستم اگه ممکنه نحوه تفسیر باندها رو توضیح بدین.
مثلا در استخراج پروتئین چگونه از روی شکل باندها میشه تفسیر کرد نتایج رو؟
منبعی میشه معرفی کنید که اینو به شکل ساده و قابل فهم نوشته باشه
ممنون و سپاسگزارم
در صورتيكه نمونه هاي قبليم اينطور نبود.
ببخشید من کار مولکولی انجام میدن با پرایمرscotاین ۵سری است هست که pcrو ژل گذاری انجام میدم پرایمرم دایمر میشه،علتش چی میتونه باشه ؟